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Resumen
El presente estudio se adelantó dentro de un proyecto de investigación para obtención de plantas resistentes al virus del mosaico del pepino (CMV), mediante la transformación y expresión del gen de la proteína de la cápside de CMV en plantas transgénicas de variedades comerciales de plátano y banano (Musa spp). Se trata de una estrategia reciente que ha sido utilizada con éxito en varios cultivos comerciales. El CMV fue detectado serológicamente (DAS-EUSA) en hojas de plátano cv. Dominico Hartón y de banano cv. Gros Michel que presentaban síntomas de mosaico. El virus se purificó parcialmente a partir de hojas infectadas de Nicotiana tabacum y con la ayuda del microscopio electrónico de transmisión, se identificaron partículas isométricas de aproximadamente 30 nm dc diámetro. El peso molecular de la proteína de la cápside en geles desnaturalizados de poliacrilamida (SDS-PAGE) fué de 28 kDa. El patrón electroforético del RNA viral de doble cadena (dcRNA) fué similar para los dos aislamientos de CMV obtenidos de plátano y banano. Utilizando la dcRNA como patrón, se sintetizó cADN por transcripción reversa y, a partir de éste, se amplificaron por PCR los genes de la proteína de Ia cápside (GPC) de ambos aislamientos. Los productos de la amplificación de aproximadamente 890 pares de bases (pb), que contenían el GPC, se donaron en el plásmido vector Bluescript KS (+/-). El análisis de restricción con endonucleasas y la secuenciación del GPC de ambos aislamientos, indicó que éstos pertenecen al subgrupo I (tipificado por el aislamiento DTL). El análisis de la secuencia nucleotídica y de aminoácidos de ambos genes, indicó una homología del 99% y un alto grado de conservación con otros miembros del subgrupo I de CMV. El GPC se está donando en plásmidos vectores para su transformación en variedades comerciales de plátano y banano en Colombia.
Helena Reichel, Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (Agrosavia)
Programa Nacional de Biotecnología Agrícola, Apartado 240142-Las Palmas, Santafé de Bogotá.
Leonardo Mariño, Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (Agrosavia)
Programa Nacional de Biotecnología Agrícola, Apartado 240142-Las Palmas, Santafé de Bogotá.Jean Kummert, Faculté des Sciences Agronomiques de Gembloux
Laboratorie de Pathologie Vegétale. 2, Passage des Déportes, B-5030 Gembloux, Bélgica.Silvio Belalcázar, Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (Agrosavia)
Programa Regional Agricola A.A. 1287, Manizales, Caldas.Javier Narváez, Corporación Colombiana de Investigación Agropecuaria (Agrosavia)
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